Resumen

El papel de la heparina (Hep) en la descondensación de espermatozoides humanos in vitro es motivo de controversia. Estudios previos de nuestro laboratorio demostraron que la actividad descondensante de la Hep in vitro se relaciona con su sulfatación. Objetivos: 1) Visualizar la interacción Hep - espermatozoide. 2) Comparar cinéticas de descondensación en espermatozoides enteros y núcleos aislados. Se utilizaron muestras de donantes normospérmicos. 1) Espermatozoides capacitados se incubaron con Hep-FITC (30´, 25ºC) y se observaron al microscopio de fluorescencia. Aunque heterogénea, la marca se ubicó principalmente (75+8% espermatozoides) en la región post acrosomal y disminuyó (32+15%) significativamente (Student, p=0.0289, n=6) por incubación previa de espermatozoides con heparina 60X. 2) Espermatozoides lavados se incubaron en SDS 1%, sonicaron y centrifugaron en un colchón de sacarosa 60%. Células enteras y núcleos aislados se incubaron con Hep 46 mM y GSH 10 mM (37ºC - 15, 30 y 60´). Se determinó la descondensación total al microscopio de contraste de fase. Los núcleos descondensaron más rápido (Paired Student, p<0,005, n=5) que los espermatozoides: 46+9% vs 2+1% (15´); 94+5% vs 7+1% (30´); 100+0% vs 11+2% (60´). Hubo descondensación con Hep sola, pero significativamente menor (Student, p=0,02) que con Hep-GSH. Estos resultados indican que Hep puede actuar directamente sobre el núcleo y sugieren que existe un mecanismo de selección a nivel de la membrana plasmática.

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2007-01-25   |   2,166 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 2 Núm.1. Abril 2003 Pags. Qviva 2003; 2(1)