Resumen

La enzima ácido 5-aminolevúlico dehidrasa (ALA-D) cataliza la condensación de dos moléculas de sustrato para formar el primer pirrol de este camino metabólico, el porfobilinógeno (PBG). El ALA-D es una metaloenzima de naturaleza sulfhidrílica que generalmente requiere como cofactores metálicos Zn, Mg o ambos para expresar su actividad. Los quelantes juegan un rol clave en el reconocimiento del catión como constituyente de metaloenzimas . La eficiencia de este proceso depende tanto del quelante como del cofactor metálico. Estudios previos realizados en la enzima de levaduras y de micelio de Mucor rouxii sugieren que el Zn es el catión involucrado en la catálisis. El tratamiento con los agentes quelantes ácido etilendiamino tetraacético (EDTA), a-a‘dipiridilo, 8-hidroxiquinolina, azida de sodio y o-fenantrolina a diferentes concentraciones (1-50 mM) mostraron que la enzima no fue afectada significatifvamente por el tratamiento con EDTA y fue inhibida por los otros quelantes, a excepción de la 8-hidroxiquinolina que a bajas concentraciones estimula la actividad enzimática. Las enzimas conservaron una actividad enzimática elevada luego de la eliminación del quelante por diálisis. Las apoenzimas fueron incubadas en presencia y ausencia de un protector tiólico y concentraciones variables (10-5-10-3 M) de diferentes cationes (Zn, Mg, Mn, Hg, Co, Cu, Fe). El Zn fue el único capaz de reconstituir completamente la actividad enzimática bajo condiciones reductoras. Estos resultados brindan mayores evidencias a nuestra propuesta de que el Zn es el metal involucrado en el sitio catalítico del ALA-D de Mucor rouxii.

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2007-01-25   |   1,739 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 2 Núm.1. Abril 2003 Pags. Qviva 2003; 2(1)