Resumen

El objetivo de esta Pasantía fue, en líneas generales, hacer participar al alumno en experiencias de investigación, desde el planteo hasta la ejecución. En este caso en particular, el alumno recibió los conocimientos teóricos de los temas a desarrollar, participó en la aplicación de técnicas bioquímicas para el estudio de proteínas con actividad enzimática y en el planteo y posterior análisis de estrategias de estudios enzimológicos. Concretamente, participó en la obtención del extracto enzimático: sobrenadante de homogenato de hígado de rata, por centrifugación diferencial, partiento de un hígado perfundido y fraccionamiento salino, con NH4SO4. Posteriormente, estuvo durante las determinaciones de los productos de la reacción enzimática, recibiendo información sobre la cromatografía líquida de alta presión (HPLC), como herramienta de separación y cuantificación de metabolitos. Analizó los cromatogramas obtenidos y procesó algunos resultados. Colaboró en la realización de la electroforesis en poliacrilamida de las distintas muestras enzimáticas y en su detección por inmuno blot. Con los datos obtenidos realizó una estimación del PM aparente, mediante el empleo de la curva de Log de PM vs. Rf y con los datos de actividad enzimática construyó una tabla de purificación, correspondiente a los pasos de purificación realizados. Conclusiones que sacó: 1) el rango de precipitación óptimo de la UroD hepática rata fue, para las ratas control, de 30-70 % SSA y para ratas porfíricas 40-70 % SSA, ya que en estos precipitados se obtuvo el mayor grado de Purificación y el mayor Rendimiento. 2) el PM aparente relativo de la UroD de rata normal fue de 79 kDa.

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2007-01-24   |   1,694 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 2 Núm.1. Abril 2003 Pags. Qviva 2003; 2(1)